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[1]杨键,金辉,王青艳,等.淀粉结合域与α-淀粉酶的融合表达及其酶学性质[J].生物加工过程,2010,8(05):39-43.[doi:doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2010.05.009]
 YANG Jian,JIN Hui,WANG Qin-yan,et al.Fusion expression of starch binding domain with α-amylase and its properties[J].Chinese Journal of Bioprocess Engineering,2010,8(05):39-43.[doi:doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2010.05.009]
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淀粉结合域与α-淀粉酶的融合表达及其酶学性质
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《生物加工过程》[ISSN:1672-3678/CN:32-1706/Q]

卷:
8
期数:
2010年05期
页码:
39-43
栏目:
出版日期:
2010-09-30

文章信息/Info

Title:
Fusion expression of starch binding domain with α-amylase and its properties
文章编号:
1672-3678(2010)05-0039-05
作者:
杨键12 金辉12 王青艳12黄日波12
1.广西大学生命科学与技术学院,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁530005
2.广西科学院国家非粮生物质能源研究工程中心,南宁530007


Author(s):
YANG JianJIN Hui WANG Qin-yan HUANG Ri-bo
1.College of Life Science and Technology,Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservaton and Utilization,Guangxi University,Nanning 530005,China
2.National Non-grain Bio-energy Engineering Research Center,Guangxi Academy of Sciences,Nanning 530007,China


关键词:
嵌合酶淀粉结合域热稳定性
分类号:
TS231;Q786
DOI:
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2010.05.009
文献标志码:
A
摘要:
利用RT-PCR从Rhizopus oryzae GX-08总RNA中克隆到糖化酶的淀粉结合域(SBD)基因(sbd),将该基因片段插入α-淀粉酶(CN7A)基因cn7a的5’端构建融合表达质粒pSE-sbdcn7a。嵌合酶SBD-CN7A在Escherichia coli JM109表达,并经Ni-NTA、Sephacryl S300纯化。酶学性质研究表明:嵌合酶在最适作用条件方面与原始酶并无明显差别;在以生玉米粉为底物时,其比酶活提高了8.7倍,而以可溶性淀粉为底物时其比酶活是原始酶的1.8倍,Km也从3.784 g/L降低为2.234 g/L;嵌合酶在65℃下的半衰期从10 min缩短为4 min。结果表明,淀粉结合域SBD的融合赋予了α-淀粉酶CN7A水解生淀粉的能力。

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期:2010-04-13
基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAD75B05);国际科技合作项目(2008DFA30710)
作者简介:杨键(1984-),男,江苏盐城人,硕士研究生,研究方向:酶工程;黄日波(联系人),教授, E-mail: rbhuang@gxas.cn


更新日期/Last Update: